液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱仪的工作原理;高压泵将储液罐的流动相通过进样器送入色谱柱,然后从检测器的出口流出。此时,整个系统充满了流动相。当待分离的样品从进样器进入时,流经进样器的流动相将其带入色谱柱进行分离。分离后,不同组分依次进入检测器,记录仪记录进入检测器的信号,得到液相色谱图。
高效液相色谱是指在经典色谱基础上发展起来的气相色谱理论。技术上,流动相改为高压输送,色谱柱以特殊方式填充小粒径填料,使柱效远高于经典液相色谱(每米塔板数可达数万或数十万),柱后连接高灵敏检测器,可连续检测流出液。
扩展数据
高效液相色谱仪配有高压二元泵或低压四元泵,泵的冲程容积和混合器的容积都会对色谱基线噪音水平产生影响,尤其是在梯度洗脱时。一般泵的冲程容积越小,混合器的容积越大,输液引起的脉冲越小,对梯度变化的响应能力越高,基线越平滑。
使用二元泵时需要注意的是,当二元混合中一种流动相的比例小于5%时,特别是使用正相洗脱进行某些药物中间体和最终产品的手性拆分时,最好使用单泵预混法。避免在色谱基线上出现与冲程相关的峰,因为在低比率下泵的泵送精度相对较差。
参考来源;百度百科-高效液相色谱仪