crispr cas9基因敲除的原理是什么?

基本原理:CRISPR簇是一个特殊的DNA重复序列家族,广泛存在于细菌和古细菌的基因组中。它的序列由一个前导序列、几个短且高度保守的重复序列和几个间隔区组成。

前导区一般位于CRISPR簇的上游,是一个富含AT的区域,长度为300 ~ 500 BP,被认为是CRISPR簇的启动子序列。重复序列区长度为21 ~ 48bp,含有回文,可形成发夹结构。

基因编辑技术的形式有:

1,同源重组

同源重组是最早用于编辑细胞基因组的技术方法。同源重组是两条相似(同源)DNA链之间遗传信息的交换(重组)。

2.核酸酶

基因编辑的关键是在基因组的特定位点创造DSB。常用的限制性内切酶对切割DNA有效,但通常是多位点识别切割,特异性差。为了解决这个问题并在特定站点创建DSB。