单细胞培养的方法有哪些？他们有什么特点？

这种比较老的技术正逐渐被淘汰，但投入少，技术含量低，人员稍加培训即可操作。

2.悬浮培养

一种非贴壁细胞的培养方法。

细胞悬浮在培养基中生长或维持。经过适应和选择，一些贴壁依赖细胞也可以用这种方法培养。增加悬浮培养的规模相对简单，只要增加体积就可以了。深度超过5mm时，需要搅拌培养基，超过10cm时，需要深度通入CO2和空气，保证充分的气体交换。

一种培养方法，通过振荡或旋转装置使细胞始终分散并悬浮在培养液中。

利用固体琼脂培养基离体培养植物组织的方法已广泛应用于植物遗传实验中。但是，这种方法在某些方面仍有不足之处。例如，在培养过程中，植物愈伤组织的营养成分和植物组织产生的代谢物质呈梯度分布，琼脂本身存在一些未知的可能影响培养的物质，可能导致植物组织在生长发育过程中的代谢变化。这个缺点可以通过使用液体培养基来克服。当植物组织在液体培养基中生长时，我们可以通过薄层振动培养或通气来提高培养基中的供氧量。植物细胞悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中，在培养过程中能保持良好的分散性。这些小细胞聚集体通常来自植物愈伤组织。

一般的操作过程是将未分化的愈伤组织转移到液体培养基中培养。在培养过程中，可以以100 ~ 120 r/min的速度进行连续旋转振动。由于液体培养基的旋转和振动，愈伤组织上分裂的细胞不断游离。混合液体培养基中的培养物，包括游离单细胞、大细胞团和接种物的死细胞残余物。

在液体悬浮培养的过程中，要及时注意细胞的继代培养，因为当培养物生长到一定时期，就会进入分裂的静止阶段。对于大多数悬浮培养，细胞在18 ~ 25天时达到最大密度，此时应进行第一次继代培养。在传代培养中，应去除较大的细胞团块和接种物残留物。如果从植物器官或组织建立细胞悬浮培养系统，它包括愈伤组织诱导、继代培养、单细胞分离和悬浮培养。目前，该技术已广泛应用于细胞形态、生理、遗传和凋亡的研究，特别是为基因工程在植物细胞水平上的操作提供了理想的材料和途径。将转化的植物细胞诱导分化形成植株，并获得携带目的基因的个体。